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大鼠食管上皮細(xì)胞

管可分為頸段、胸段和腹段。脊椎動(dòng)物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端,胸段位于左、右肺之間的縱膈內(nèi),胸段通過(guò)膈孔與腹腔內(nèi)腹相連,腹段很短與胃相連。在發(fā)育過(guò)程中,食管的上皮細(xì)胞增殖,由單層變?yōu)閺?fù)層,食管使管腔變狹窄,甚至一度閉鎖,以后管腔又重新出現(xiàn)。哺乳動(dòng)物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層:黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中,黏膜層,包括上皮、固有層和黏膜肌層。上皮為較厚的未角化的復(fù)層扁平上皮,耐摩擦,有保護(hù)作用。在食管與胃賁門(mén)交界處,復(fù)層扁平上皮突然變成單層柱狀上皮。

鼠食管上皮細(xì)胞分離培養(yǎng)及鑒定

 

簡(jiǎn)介

材料

成年豚鼠、手術(shù)剪、手術(shù)鑷、75%酒精、雙抗、FBS、培養(yǎng)皿、15ml離心管、DMEM、PBS、D-Hanks、胰酶;

方法

1)處死鼠,取食管組織,去除肌肉層,PBS清洗;

2),將上皮層組織剪成1mm×1mm×1mm組織碎片,加入0.1%I型膠原酶消化2-4h;

3)消化液渾濁后終止消化,過(guò)200目細(xì)胞網(wǎng)篩,1000rpm,5min離心,去上清,沉淀重復(fù)離心2次;

4)細(xì)胞沉淀種明膠包被的培養(yǎng)皿中,隔天換液;

【培養(yǎng)】

上皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)液

【鑒定】

1)免疫熒光:

陽(yáng)性:CK18


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